МИНРОЦИТЫ

МИНРОЦИТЫ, см. Макроциты. МИКРУРГИЯ. Содержание: Исторические данные............317 Аппараты (микроманипуляторы), инструментарий....................317 Общие приемы проведения микроопераций . 324 Фотографирование микроопераций......325 Микрооперации при падающем свете.....326 Ультрамикроскопическая микрургия.....327 Примеры применения микрургич. методики в разн. областях биологии и медицины.....327 Микрургия (от греч. mikros—малый и ergon—дело), работа, методика и техника, при помощи к-рых можно произвести те или иные воздействия (микрооперации) на очень малых объектах (отдельной клетке и т. п.) при увеличениях сложного микроскопа. Название «микрургия» предложено Петерфи (Peterfi). Специальный аппарат с механиче- скими приспособлениями для тончайших движений микроинструментов называют микроманипулятором (Петерфи). М., по Петерфи, является собирательным понятием для микродиссекции, микроизоляции, микроинъекции, микровивисекции и т. п. В противоположность Германии в Америке и Англии термин «микрургия» мало употребителен; чаще всего там просто говорят о микродиссекции и микроинъекции. В последнее время обособились 2 больших области микроопераций. 1) Микрооперации над несколько большими объектами (примерно величины яйца морских ежей, целых зародышей ранних стадий развития и т. п.), к-рые производят под контролем невооруженного глаза или при увеличениях препаровальной лупы (препаровального микроскопа) без помощи микроманипулятора, причем действуют микроинструментами, держа их просто в руках; эти операции называют, по Шпеману (Spe-mann), микрохирургическими операциями. 2) Такие микрооперации над более мелкими объектами, над отдельной клеткой и ее частями (их называют иногда клеточными операциями—Zelloperationen, M. в узком смысле слова), когда воздействия производят при средних и больших увеличениях сложного микроскопа посредством микроманипулятора. Первые применяются гл. обр.' в механике (физиологии) развития, вторые—для различных цитологических, микробиологических исследований, изучения протоплазмы и т. д. Насколько необходимы специальные механические приспособления для микроопераций при больших увеличениях, явствует уже из того, что операционное поле—поле зрения микроскопа (при апохроматическом объективе 2 мм с компенсационным окуляром № 4) составляет площадь всего только в 0,035 мм² (Chambers). Если изобретение микроскопа сделало наше зрение как бы более тонким, то изобретение и усовершенствование микроманипулятора превратило сравнительно грубые движения наших рук в тончайшие и точнейшие движения микроинструментов, причем все движения микроинструментов могут непрерывно контролироваться с помощью микроскопа. С другой стороны современная техника изготовления микроинструментов такова, что позволяет приготовить например микроиглу, острие которой оказывается совершенным при проверке помощью самых больших увеличений микроскопа (особенно, если микроинструмент подвергнуть окончательной обработке также под микроскопом при помощи микрокаутера Петерфи), или микропипетку, диаметр отверстия к-рой равен 5 р или даже 1—^г/₂ /и (Chambers). В настоящее время микрургическая методика и техника с успехом применяются не только в различных областях микробиологии (в особенности для изолирования одной единственной клетки) и цитологии, где впервые начали разрабатываться методы М., но и для изучения физ. и физиол. свойств протоплазмы, в физ. химии (для исследования коллоидов), в экспериментальной зоологии (напр. для удаления ядра из оплодотворенного яйца аксолотля в опытах по гибридизации и полу- чения дробления безъядерных клеток), в физиологии (для изучения сокращений отдельной мышечной клетки, регенерации нервных волокон, для изучения секреции мочи путем добывания ее непосредственно кз почечных гломерул и т. п. и для изучения функции кровеносных капиляров и т. д.). Исторические данные. В старой ботанической и зоологической литературе рассеяны отдельные указания на различные микроманипуляции, те или иные воздействия на клетку, произведенные прямо от руки, в которых особенно искусными мастерами были нек-рые выдающиеся биологи 60-х и 70-х гг. 19 в. Однако специальная техника микроопераций была разработана сравнительно недавно. Между 1904 и 1910 гг. Мек Клендон (Мс Clendon) в Нью Иорке, Барбер (Barber) в Канзасе, Шоутен (Schouten) в Голландии независимо друг от друга разработали технику, к-рая позволяла манипулировать (оперировать) чрезвычайно тонкими стеклянными инструментами (иглами и пипетками), подведенными к объекту снизу, в поле зрения сложного микроскопа при больших увеличениях. Шоутен (1899) и Барбер (1904) применяли свою технику почти исключительно для изолирования микроорганизмов (отдельных особей). Впервые в 1912 г. Кайт (Kite), а затем Кайти Чемберс (1912) применили эту технику для цитологических целей, для изучения физ. свойств протоплазмы. С этого времени особенно много и плодотворно работали в этой области Чемберс, Петерфи, Тейлор (Taylor) и некоторые др. Аппараты (микроманипуляторы), инструментарий. Для М. необходимы: 1) микроманипулятор, 2) микроинструменты, 3) операционная (влажная) камера и нек-рые др. приспособления. 1. Микроманипуляторы. Среди современных микроманипуляторов наилучшими являются микроманипулятор Петерфи (изготовляемый фирмой К. Цейс) и микроманипулятор Чемберса (фирмы Лейц); микроманипулятор Тейлора (Taylor) заслуживает внимания по сравнительной простоте своей конструкции. Микроманипулятор Петерфи состоит из широкого, массивного основания (рисунок 1), посередине к-рого помещается микроскоп, а по бокам прочно укреплены 2 операционных штатива (рис. 1 Вг и Б1) (2 «ассистента» по выражению Петерфи), к-рые и представляют собой механические приспособления для укрепления и движения инструментов. М и-кроинструмент: его более толстая, металлическая или стеклянная часть nh укрепляется посредством зажима ik сверху этого штатива («ассистента»). Каждый инструмент приводится в движение в этом микроманипуляторе при помощи 6 винтов, грубых и тонких. Для боковых («перлятеральных») движений (вправо—влево) кончика микроинструмента служат винты: грубый / (рис. 1) и тонкий 1; для вертикальных движений (вверх—вниз)—11 и 4; для саги-тальных (вперед—назад)—вращение всей колонки вокруг вертикальной оси просто рукой и тонкий винт 2; движение (по дуге) снизу вверх и наоборот осуществляется винтом 3. На каждой стороне микроманипулятора следовательно по 6 винтов, а всего—12; если прибавить сюда 2 винта подвижного столика микроскопа и 2 винта для обычной установки микроскопа (наведение на фокус), то всего для производства различных манипуляций в распоряжении исследователя имеется 16 винтов. Для каждого движения имеется более грубый винт (кремальерный), производящий движения, заметные невооруженным глазом, и микрометрический винт для тонких движений при больших увеличениях. Обыкновенно большую часть микроопе- I раций (см. ниже) производят с одним или с двумя операционными штативами; изредка возникает необходимость еще в 1 или 2 дополнительных, к-рые привинчиваются к тому же основанию.

Рисунок 1.

Микроманипулятор Чемберса отличается от предыдущего прежде всего в том отношении, что инструменты расположены спереди столика микроскопа: оба инструмента подводятся к объекту с одной стороны. Имеются 2 типа микроманипулятора Чемберса: в одном указанное механич. приспособление для передвижений микроинструмента прикрепляется к столику микроскопа, в другом на особой колонке укрепляется к массивному основанию, на которое помещается и микроскоп. Практичнее (по указанию Чемберса) привинчивать левое приспособление к столику микроскопа, правое (с колонкой) укреплять к основанию. Оба микроинструмента при этом должны располагаться близко один к другому. К микроманипулятору Чемберса приспособлена удобная микропипетка, функционирующая посредством особого шприца типа Люера. В новой модификации микроманипулятора Чемберса, приспособленной для определения рН и гН внутри клетки (Needham), оба механические приспособления (для 2 инструментов) расположены один над другим у боковой стороны столика микроскопа и укреплены на одной колонке. Микроманипулятор Тейлора (Taylor) представляет собой как бы упрощенную модель микроманипулятора Петерфи: на массивном основании (чем достигается необходимая устойчивость) в

РИС. 2.

середине помещается микроскоп (рис. 2), с боков— 2 операционных штатива (2 микроманипулятора по терминологии Тейлора); 3 основных движения микроинструментов, к-рые прикрепляются сверху операционных штативов, обеспечиваются винтами с тонкой нарезкой; штатив имеет основание в виде круга, т. ч. возможно вращение его вокруг вертикальной оси.—Все 3 упомянутые микроманипулятора удовлетворяют главнейшему требованию—иметь возможность производить с уверенностью тончайшие движения микроинструментами под контролем микроскопа. I с любыми увеличениями. Эти микроманипуляторы оказались вполне пригодными для самых разнообразных микроопераций. Наряду с достоинствами каждый из них имеет и нек-рые недостатки. Микроманипулятор Петерфи наиболее универсален; он допускает более обширные передвижения инструментов посредством обыкновенных и микрометрических винтов. — Микроманипулятор Чемберса менее громоздок, но с меньшими возможностями в отношении передвижений микроинструментов; отличается простым, более удобным приспособлением для микроинъекций (см. ниже микропипетки) по сравнению с микроманипулятором Петерфи. Микро манипулятор Тейлора с несколько меньшими возможностями, но заслуживает известного внимания вследствие простоты конструкции. Если не требуется больших увеличений, во многих случаях вместо больших моделей микроскопа удобно пользоваться напр. бинокулярным препаровальным микроскопом Цейса. Последняя комбинация оказывается особенно ценной в тех случаях, когда хотят рассмотреть напр. какой-нибудь орган in situ, не вынимая его из тела животного, и произвести при этих условиях то- или иное воздействие при помощи микроинструментов (см. отд. табл., рис. 9). В нек-рых случаях специальные мик-романипуляторы могут быть заменены более простыми механическими приспособлениями и различными импровизациями. Можно напр. прикрепить микропипетку к верхнему кольцу (держателю) препаровальной лупы, основание лупы прочно укрепить на столе и для передвижения микропипетки вверх — вниз пользоваться кремальерным винтом лупы, а при помощи винтов подвижного столика микроскопа сообщать объекту движение вбок и в др. нужных направлениях. При известном навыке удается производить нек-рые микрооперации над клетками и без микроманипулятора, держа микроинструменты прямо руками. Во всяком случае микрооперации при увеличении в 300 и более раз требуют применения микроманипулятора (Петерфи). 2. Ми кр о инструменты и их изготовление. В М. применяются почти исключительно стеклян. микроинструменты, так как инструменты из металла (платины, меди, стали), не говоря уже о трудности их приготовления, при требуемой тонкости острия (не толще 1—2 ц) оказываются не прочнее стеклянных. Центр тяжести микрурги- ческой техники лежит прежде всего в в изготовлении хороших стеклянных микроинструментов, пригодных для намеченных микроманипуляций. Для самых различных микроопер аций пользуются в большинстве случаев двоякого рода инструментами: микроиглами и микропипетками. Все эти микроинструменты изготовляются при помощи микpoгopeлки(Mikrobrenner)(pиc.З); такая горелка (газовая или ацетиленовая) должна давать очень маленький язычок пла-

Рисунок 3. Микрогорелка (слева) и ламповое сопротивление с включателем для электрических микроинструментов.

мени в 1—2 мм высотой,очень узкий, острый вверху; для получения такого пламени на тонкую трубку микрогорелки надевается тонкая игла от шприца или импровизируется стеклянная микрогорелка. Для приготовления микроинструментов пользуются следующими сортами стекла (в виде трубок; для микропипеток можно применять стекло и в виде палочек): а) тугоплавкое иенское стекло (Jenaer Hartglas, Thermometerglas) или Pyrexglas, кварц (требуется оксигенирован-ное пламя)—для изготовления особенно тонкого острия; б) т.н. тюрингенское нормальное стекло (Tlmringer Normalglas) применяется чаще всего для самых разнообразных инструментов; в) обыкновенное стекло в трубках— для приготовления более грубых пипеток (Петерфи). Для микроигол закупают трубки стекла с внешним диаметром в 6—7 мм, с толщиной стенок в 2—3 мм, для микропипеток—тонкостенные трубки с поперечником в 1—1^х/₂ см при толщине стенок в 1—1^х/₂ мм (не больше). Микроиглы приготовляются б. ч. соответственно следующей общей схеме. Сначала из отрезка трубки (рис. 4, /) по общим правилам (размягчая среднюю _         ________ь_______________L I................--( )          а,                Ж               а_г          [ Jd = 7Jt» ------------------------^f------------------------'^~j I-----------------------15 CM------------.----------- иг........----------(Г               ~              гк^мм IV-.....-fl-5------^=-----^----------Г с О v--fl—5----> ^mc - j- ^mc -се а yr..........______________Гъм^1 mc- Рисунок 4. Схема изготовления микроиглы и микропипетки. часть ее на обычном пламени и растягивая концы в стороны) приготовляют ровный (диаметром приблизительно в 4 мм), достаточно длинный капиляр; от этого капиляра при помощи так наз. «алмазного карандаша» (Schreibdiamant) отрезают ненужные боковые части а,ио(, средний же капиляр длиной около 15 см (рис. 4, III), держа его над очень маленьким микро-пламепем, осторожно нагревают в одном пункте (с) и вытягивают вне пламени очень тонкий, еле видимый невооруженным глазом микрокапиляр (рис. 4, /V). После этого, держа капиляр с с средней еще более тонкой частью тс достаточно высоко над микропламенем и очень осторожно приближая к последнему, плавным движением растягивают капиляр за концы с₁ис₂в стороны: получаются 2 микроиглы (рис. 4, V). Качество острия проверяется под микроскопом: если капиляр был слишком нагрет, получается не прочная микроигла, а стеклянная нить, колеблющаяся даже от дуновения. Затем микроигла недалеко от острия (как показано стрелкой на рис. 4, V) слегка нагревается и при помощи обыкновенной препаровальной иглы загибается кверху под прямым углом (или под углом в 70—80°); высота вертикальной части такова, чтобы ею можно было без труда манипулировать в операционной камере: в зависимости от высоты камеры—примерно 1—5 мм. Готовая стеклянная микроигла (рис. 4, V/) вставляется в металлическую рукоятку d, прилагаемую к микроманипулятору. Аналогичным образом приготовляются и м и к р о-пипетки; берется тонкостенная трубка, и при нагревании середины микрокапиляра (рис. 4, IV) растягивание в стороны производится не так плавно, а с некоторым порывом—микрокапиляр разрывается, получаются 2 микропипетки (как при V); проверяют под микроскопом, получились ли микропипетки или иглы. Кончик микропипетки также загибается кверху.—Применяются и нек-рые другие приемы изготовления. Более надежно можно приготовить тончайшее острие у микроиглы посредством микрокаугера в поле зрения микроскопа. Микрокаутер представляет собой стеклянную трубку, в к-рую впаяна тонкая платиновая проволока в виде дуги, снабженной

•*" '.J !

Рисунок I. Перерезание клетки в тканевой культу ре: в—подведение копчика мпкроиглы к клетке: b момент перерезания клетки микроиглой. Рисунок 2. Ультрамикроскоимческая микрургия: исследование при помощи ижеронгды налочкообразнш КОЛЛОИДНЫХ частичек пягиокиси ванадия (но Петерфн). Рисунок •!. Копчики различных стеклянных мнкроигол. Рисунок 4. а оттягивание микрош.юи прогон.i.i;imi4 клетки (из опытов Чемберса с яйцами иглокожих); Ь оторвавшаяся часть цитоплазмы округлилась в виде капелек. Рисунок 1. Растягивание эритроцита двумя микронглами (по Зейфрицу). Рисунок (>. Ин1>екцпн индикатора (Prniii-Krcsol-Pnrpiir) внутрь клетки микропипсткон и повреждение окрасившейся клетки мпкроиглон; понре-жденная—более светлая область вместо синеватого (а) приобрела желтый оттенок (1>), соответствующий рН 5.4 5,6. Рисунок 7. Мнкропетля с н:юдироваввой одной едннстве1вюй бактерией; слева кран капли с бактериями. ."г. Микрургия. Рисунок 8. Мпкроманипулятор Петерфи со вспомогательным оборудованием: а —микроманнпулятор с микроскопом, на столике микроскопа — операционная камера Петерфи; b — распределительная доска с регулятором для операционной камеры, включателем и т. д.; с — ламповое сопротивление и включатель для мнкро-каутера, электрической микропипеткп и т. п.; d — набор стеклянных микроинструментов, сохраняемых в пробирках. Рисунок 9. Микрооперации при падающем свете: а—операционный столик с укрепленным на нем животным; b — препаровальный бинокулярный микроскоп с прикрепленной к нему лампочкой; с — операционный шта- |пв мпкроманипулятора с микропнструментом. платиновым кончиком (рис. 5). Микрокаутер укре-«ляют на одном операционном штативе микроманипулятора, на другом помещают обыкновенную микро-иглу, вытянутую ручным способом. Включают ток от ■аккумулятора (2—4 V, 1--1¹/» А) иля от городской осветительной сети (введя ламповое сопротивление с подвижным реостатом; рис. 3); к нагретому платиновому отростку или прямо к дуге (в зависимости от начала) подводят стеклянный кончик микроиглы так,

Рисунок -5. Набор инструментов для микрургии: а—микропипетка (для рта); 5—микрокаутер; с—электрическая пипетка Петерфй; d—металлическая рукоятка для микроиглы; е—операционная камера Петерфй; /—микропинцет по Петерфй.

■чтобы он, расплавившись, прилип к платиновой проволоке, и вытягивают нужное острие. Посредством микроманипулятора иглу, загнув ее кончик, можно •превратить в микропетлю для микробиологических работ. Микроиглы бывают разного типа: более широкие и прочные (см. отд. табл., рис. 3), или с очень острым,тонким, коротким шипом на конце, или с слегка закругленными, притуплёнными концами [такие иглы, вставленные в соответствующее ме'таллическое приспособление (рис. 5, f), играют роль микропинцета], или могут быть изогнутыми в виде штыка, приспособленного для резания.— Различают 2 типа микропипеток: микропипетки с резиновой трубкой и мундштуком для рта (мундштучные пипетки, Mundpi-pette по терминологии Петерфй), поперечник выходного отверстия к-рых больше 25 fi (рис. 5), и более тонкие пипетки («клеточные пипетки», Zellpipette) для введения внутрь клеток и т. п. с отверстием меньше 25 ц. Для введения внутрь клетки чаще всего применяются микропипетки с шириной выходного отверстия в 8—15 /* (Петерфй) или даже в 1—!/₂ fi (Чемберс) (рис.6). При таком тонком _А                              отверстии требуется значительное давление, чтобы прогнать через него жидкость; для этого необходимы специальные приспособления. В первоначальной микропипетке Барбера нужное давление достигалось довольно примитивно посредством нагревания или охлаждения столбика ртути, находящегося в запаянном конце пипетки. В микропипетке Чемберса -требуемое давление или всасывание создается" при помощи тщательно выбранного стеклянного шприца (Люеровского типа), который посредством длинной, гибкой ме- Рисунок 6. Кончики микропипетки Чемберса: А— запаянный; Б — обломанный под контролем микроскопа; В—обычным способом вытянутая и разорванная пипетка. таллич. трубки соединяется со стеклянной микропипеткой (последняя герметически приклеивается к трубке). В микропипетке Тейлора вращением винтов создается давление на резиновую прокладку и на ртуть; последняя выталкивает или втягивает нужное количество жидкости через тонкий кончик микропипетки. В электрической пипетке Петерфй (рис. 7)электрический Ток(1—Р/гА; если от городской сети,—необходимо ламповое сопротивление) (см. отд. табл., рис. 8) накаливает тонкую платиновую проволоку и нагревает воздух внутри пипетки, который и выталкивает содержимое микропипетки; пользуясь боковым вентилятором пипетки можно производить и более быстрые и более медленные инъекции. Тонкая стеклянная микропипетка герметически укрепляется к более толстой части электрической пипетки парафином или специальным клеем (смесь колофония с воском).—Для сохранения мик-роигол и микропипеток пользуются обыкновенными пробирками, для чего инструмент укрепляют в пробке, к-рой затыкают пробирку так, чтобы микроинструмент оказался внутри пробирки, не касаясь ее краев и дна (см. отд. табл., рис. 8).В тех случаях, когда давление, развиваемое электрическ. пипеткой, недостаточно, Петерфй предлагает пользоваться т. н. пипетками с повышенным да- влением и вакуум-пипетками (Носп-druck - Vakuumpi-pette), .изображенными на рис Кроме микроиго л и микропипеток, с помощью которых производится ббль-

Рисунок 7.

шая часть самых разнообразных операций, иногда требуются и нек-рые специальные инструменты. Для опытов по раздражению клеток, для электрометрических измерений и т. п. применяются микроэлектроды. Кроме обыкновенных металлических электродов, в которых платиновая или Волласто-новская проволока пропущена внутри стеклянной трубки, тонкий же кончик выступает наружу, применяются неполяризую-щиеся электроды. Для приготовления микрозлектрода по способу Эттиша и Петерфй микропипетку (стеклянный капи-ляр) наполняют агаром с хлористым калием (2 %-ный агар в ⁿl_l0 KC1)—это острие электрода. Другим концом его прикрепляют к Т-образному микрокаломель-электроду. В биологических опытах, где К сможет оказать вредное влияние, КС1 может быть заменен Рингеровским раствором (Петерфй). Предложены микроэлектроды и других конструкций (Тейлор, Whitaker и др.). Чахотиным сконструирован особый прибор для локализованного повреждения клетки посредством тонкого пучка ультрафиолетовых лучей. Иногда изготовляются и другого рода инструменты: к стеклянной игле при помощи капельки канадского бальзама прикрепляют чешуйку бабочки и получают миниатюрный шпатель или, если прикрепить чешуйку . ребром, маленький ножичек и т. д. Для этих целей могут быть б. м. а. т. xviii. и S28 использованы самые разнообразные объекты растительного и животного происхождения. 3. Операционные (влажные) камеры. Чтобы объект для микроманипуляции можно было рассматривать при большом увеличении и в то же время он был доступен снизу воздействию микроинструментов, пользуются особыми операционными камерами,

Рисунок 8. Вакуум-пипетка и пипетка с повышенным давлением.

в к-рых для предохранения объекта от высыхания поддерживается влажность («feucbte Karamer»). Стеклянные камеры Барбера, Чемберса и др. устроены так, что одна сторона их открыта для введения инструментов, а сверху помещается покровное стекло объектом вниз. Наиболее распространенная камера Петерфи (рис. 5) состоит из металлической рамки (1см в высоту, 3 еж в ширину и 9 см в длину), правая и левая стороны к-рой открываются для введения инструментов; на дне камеры стеклянная пластинка; вдоль длинных сторон имеются желобки, в к-рые при .работе, для поддержания влажности закладываются полоски сильно увлажненной ваты или фильтровальной бумаги. Сверху укрепляется покровное стекло объектом вниз. Чтобы осуществить полную герметичность камеры при введенных в нее микроинструментах, Петерфи предложил пользоваться тонкими резиновыми манжетами, одна сторона которых прикрепляется к камере, а другая плотно охватывает более толстую часть инструмента; однако это оказалось излишним и непрактичным, и Петерфи в последнее время ими не пользуется. В тех случаях, когда необходимо проводить микрооперацию и следить за вызванными ею изменениями при t° тела, применяют специальные операционные камеры с нагревом (нагревательный столик менее пригоден). Нагревающаяся влажная (универсальная) камера Петерфи состоит из 2 частей, одна из к-рых представляет собой собственно операционную камеру (высота ее может изменяться от 4у_алш до 10 мм), а в другой помещено приспособление для нагревания и регулирования t° (биметаллический регулятор). Для нагревания пользуются городской осветительной сетью: на отдельной доске (см. отд. табл., рис. 8) помешается включатель—ламповое сопротивление, а тонкий регулирующий механизм питается током из ■отдельного маленького элемента (как для электрического звонка; элемент и реле помещены на той же доске), так что к камере идут 4 провода: 2 для нагревания, 2 для регулирования. Покровные стекла, закрывающие сверху камеру, имеют чаще всего размер 25 х 52 мм. Оптические условия. При работе-с малыми или средними увеличениями можно пользоваться любыми источниками света. При микрооперациях с большими увеличениями и для микрофотографирования следует по возможности применять интенсивные источники света—100-ваттные лампы «Osram-Nitralampe», дуговые лампы (применяющиеся для микрофотографии), Punkt-lichtlampe (последние прекрасны сами по себе, но очень требовательны и при неправильной подаче тока нередко совсем перестают функционировать). Если объект очень чувствителен к тепловому воздействию, то между микроскопом и источником света включаются поглощающие тепло ванны. Т. к. при микрооперациях объект находится не в плоскости столика микроскопа, а значительно выше, то для создания подходящих условий освещения можно от обыкновенного-осветителя Аббе отвинтить верхнюю линзу (Чемберс) или же применять специальные-конденсоры. В виду указанного обстоятельства и для получения хорошего темнополь-ного освещения необходимы особые конденсоры, например Praepari er-Wechse lkon-densor Петерфи (см. Микроскоп). Общие приемы проведения микроопераций. Объект, предназначенный для всевозможных микроопераций, разных воздействий, чаще всего помещается на тщательно-очищенном (!) покровном стекле по типу «висячей капли» в каком-нибудь физиол. растворе (Рингер-Л окка, Тироде и т. д.), сыворотке, плазме крови и т. п. Тканевые культуры (см. Культуры тканей), к-рые дают возможность производить микрооперации над клетками г наиболее так сказать физиол. условиях (Пэтерфи, Кронтовский), приготовляются для микрургических целей на покровном стекле (не на слюде!) в очень тонком слое плазмы (Петерфи) или даже в тонком слое жидких сред (Кронтовский). Чтобы клетки в обычной «висячей капле» не плавали, а удерживались на месте в силу ка-пилярности, в большинстве случаев достаточно отсосать с помощью микропипетки (с мундштуком) излишек жидкости.—Иногда целесообразно предварительно нанести , на покровное стекло тонкий слой Ь—2%-ного раствора желатины или агара. В некоторых случаях, если этого недостаточно, более крупные объекты удерживаются на месте посредством микроиглы или микропинцета—двух микроигол с притуплёнными концами [см. отд. табл. (ст. 319—320), рис. 3], вставленными в металлическое приспособление (рис. 5), которое посредством вращения винта позволяет сближать или удалять друг от друга концы игол. Можно удерживать объект и при помощи микрошпателя.—Если объекты слишком малы (поперечник меньше 20—25 /л), то можно воспользоваться следующим приспособлением (Mikrowasserlei-tung, по Петерфи): на покровное стекло наносят капельку физиол. раствора и кладут в нее маленький кусочек т. н. шелковой японской бумаги (или тонкой фильтровальной бумаги, ваты); на эту бумагу капают- каплю взвеси нужных клеток, и кусочек бумаги вместе с материалом расщипывают препаровальными иглами. В промежутках между волокнами образуются тонкие пленки жидкости, в к-рой и отыскивают подходящие для микроопераций отдельные клетки. Общая схема проведения микроопераций такова: на столике микроскопа укрепляют операционную камеру (без покровного стекла и объекта). Готовый и проверенный микроинструмент укрепляют зажимом на операционном штативе (обернув держатель японской бумагой или ватой). Конец микроинструмента при помощи грубых винтов приводят в поле зрения микроскопа (при малом увеличении) и устанавливают точно в центре (проверка при большом увеличении!). Затем микроинструмент опускают прямо вниз (не касаясь винтов для других движений, чтобы не нарушать центрировки и не увести инструмента за пределы поля зрения) почти до дна операционной камеры. После этого, не сдвигая ни камеры ни инструмента, покровное стекло с объектом укрепляют при помощи вазелина (если нужно—клеем или полосками лейкопласта, напр. при работе с иммерс. системой) на операционной камере (объектом вниз). Нужный объект (какую-либо клетку) устанавливают (винтами подвижного столика микроскопа) в центре поля зрения. Затем центрированный ранее инструмент (при малом увеличении) осторожно поднимают вверх до тех пор, пока его тень не появится в поле зрения; тогда несколько отводят инструмент так, чтобы он при дальнейшем подъеме не мог повредить данную клетку, а оказался недалеко от нее; затем производят ©кончат, установку кончика инструмента и объекта в поле зрения. Наконец располагают их так, чтобы можно было произвести нужное воздействие [см. отд. табл. (ст. 319— 320), рис. 1]. Если напр. нужно разрезать клетку или отрезать от нее часть, то этого можно достичь тремя путями (по Петерфи): 1) воткнуть острие микроиглы и дальнейшим проведением иглы через протоплазму отделить нужную часть: 2) разрезать простым надавливанием, проведением очень топкого, прочного острия иглы (см. отд. табл., рис. 1); 3) медленно разделить, перешнуровать клетку при помощи гибкого кончика иглы (Тейлор), в нек-рых случаях штыкообразно изогнутого (Петерфи) (рис. 9).-—При помощи микроигол производят и многие другие операции: удаление ядра из клетки (вещество ядра, поскольку оно жидкое, можно* удалить и микропипеткой), внесение в клетку крупинки индикатора или какого-нибудь другого вещества [см. отд. табл. (ст. 319— 320), рис. 6] и т. п. Фотографирование микроопераций. Для ебъективной регистрации хода микроопе- -рации и совершающихся при этом измене- . ниях в объекте (клетке, ее ядре и т. п.) очень важно иметь возможность, не прерывая работы, моментально сфотографировать любой момент. Зарисовка и фотографирование с обычной микрофотографической аппаратурой может дать лишь очень мало в этом отношении. Поэтому особенно ценными для указанной цели оказываются все те совре-

w

Рисунок 9. Разрез на месте соединения двух клеток в тканеной культуре (по Оливо). величину: на рис. 4 менные аппараты для микрофотографирования, которые позволяют смотреть в микроскоп и в то же время делать моментальные съемки в виде снимков отдельных моментов, серий снимков (Serienaufnahmen) или же мик-рокинематографич. съемок.—Из разных систем аппаратов первого типа заслуживает особого внимания фотографический окуляр Цейса «Phoku» (и аналогичные аппараты др. фирм). Эта маленькая камера (47₂Хб) насаживается сверху на тубус микроскопа вместо окуляра; часть лучей посредством призмы отведена в боковую трубку, обращенную к исследователю; во время всей микрооперации микрург смотрит в эту трубку (окуляр), нажимая в нужный момент спуск затвора. Получаемая в виде круга микрофотография имеет всего около 3,5 см в диаметре, но вследствие высоких качеств оптики Цейса может быть увеличена во много раз. На рис. 1 и4(отд. табл., ст. 319—320)- приведены две полученные таким путем микрофотографии в натур. сфотографирована клетка (в тканевой' культуре) с темной, зернистой протоплазмой, с несколькими ядрами (светлыми пятнами); вблизи клетки виден кончик подводимой к клетке микроиглы; на рис. 1 сфотографирован момент перерезания клетки, отделения части цитоплазмы с одним ядром.—В последнее время фирма Лейц (в Вецларе) выпустила новую маленькую камеру (похожую на «Phoku») для кинопленки («Mifilmca»). Этот аппарат позволяет в короткий промежуток времени (без перемены кассеты) сделать серию из 36 снимков (формата 24x36 мм), что особенно ценно в М.—Для микрокинематографии микроопераций могут быть использованы как кинокамеры, помещающиеся сверху микроскопа (в этом случае между кинокамерой и микроскопом нужно вставить боковой окуляр, напр. типа Phoku или Einblickokular Scheminzk'oro, и внести незначительные изменения в расположение, расст новку подсобных частей микроманипулятора), так и камеры типа «Kinamo» Цейса с микрофотом, к-рые приставляются сбоку к микроскопу (рисунок 2 в ст. кинематография); нужно только несколько модифицировать штатив; иногда убрать один операционный штатив (без к-рого в большинстве микроопераций можно обойтись) и т. п. В последнее время Т. Петерфи приготовил прекрасною кинофильму, демонстрирующую микрургическую методику и технику а также основные, типичные микрооперации. Эта фильма под названием «Das mikrurgische Verfahren» выпущена в продажу в Берлине специальным из атель-ством научных фильм (Verlaa: Wissenschaft-lichen Filme); этим же издательством выпущена также кинофильма А. Фишера по технике тканевых культур. Микрооперации при падающем свете. Современное развитие методики и техники ми- *и кроскопических исследований при падающем свете делает возможным в наст, время применение микроопераций и различных воздействий к непрозрачным объектам, даже к тканям и органам, оставленным in situ в организме животного, напр.: изучать, как действует на сосуды брыжейки раздражение микроиглой, исследовать циркуляцию в гломерулах почки, определять реакцию сосудов опухоли на местное применение адреналина. В таких случаях микроинструменты подводятся не снизу, как обычно в М., а сверху [см. отд. табл. (ст. 319—320), рис. 9]. Малое расстояние между объективом и объектом затрудняет работу; все же при известном опыте удается работать с сухими системами, дающими увеличение до 900 раз (Vonwiller). Удобно сочетать микроманипулятор с препаровальным микроскопом (рис. 9 на отд. табл.) и пользоваться, если это возможно, обычным дневным светом или лампочкой, приспособленной к микроскопу (как для капиляроскопии), или же применять вертикальные иллюминаторы, например Spalt-opakilluminator с простой или щелевой лампой Гуль-странда соответственно технике Фонвиллера. Для удобства таких исследований фирма Лейц выпустила передвигающийся посредством винтов столик, на к-ром можно укрепить напр. иммиболизированного кролика, растение в горшке с землей и т. д. Подобным образом Фонвиллер в опытах с насекомоядным растением Pincuicula извлекал микроиглой или ми-кропипеткой капельку секрета из отдельных железок и подвергал его разным исследованиям. — Операционный штатив («ассистент») микроманипулятора вместе со своим основанием (если нужно, правый штатив привинтив слева) или укрепленный на другой подставке может быть расположен и у постели больного, напр. для вылавливания из крови б-ного, выпускаемой тут же в чашки Петри, отдельных экземпляров филярий и т. п. Ультрамикроскопическая микрургия. При работе с темнопольным освещением при слабых или средних увеличениях (с использованием Praeparier-Kondensor'oB Петерфи) никаких особых затруднений не возникает (Петерфи и Wamoscher). Если же при данной работе требуются более сильные системы с более высокими апертурами, то приходится применять особую «ультрамикроскопическую М.», разработанную Петерфи и Шегвари (Szegvari). Главная особенность этой методики состоит в том, что при этом производят микровоздействия в плоскости столика микроскопа и применяют параболоид- или кардиоид-конденсоры высоких .апертур (см. Микроскоп). Для проведения ультрамикроскопич. манипуляций с коллоидными структурами Петерфи пользуется в качестве предметного стекла тонкой стеклянной пластинкой с наклеенной на нее полоской, приготовленной из покровного стекла (рис. 10): их общая высота для кардиоид-конденсоров должна равняться 1,05 мм, а для параболоид-конденсоров—1—2 мм. Микроинструменты приготовляются из возможно тонкого капи-ляра (1—1²/г мм), причем его концевая часть должна иметь в толщину только 0,05—0,1 мм. Когда тонкий кончик такого микроинструмента или пипетки направлен на наклеенную полоску, на нее наносят капельку исследуемого коллоидного раствора и при помощи приспособления (рис. 10, справа), укрепленного на другом операционном штативе, опускают полоску, приготовленную из покровного стекла таким образом, чтобы тонкий слой коллоидного раствора находился между строго параллельными горизонтальными плоскостями. Таким путем Петерфи и Шегвари в старых золях окиси железа, в мылах и т. п. исследовали растяжимость ультрамикроскоп, нитей, в золях пяти-окиси ванадия—вращение палочкообразных ультрачастичек [см. отд. табл. (ст. 319—320), рис. 2] и т. д. Подобным же образом можно подробно изучать при сильных увеличениях (Цейс, специальный объектив X или Y) протоплазматические образования, миксомице-ты и т. д. (Петерфи). Примеры применения миврургической методики в разных областях биологии и медицины. Развитие микрургической методики и техники создало новые возможности j и уже теперь несмотря на недавнее возникновение этой экспериментальной области микрур-гические методы нашли плодотворное применение в самых разнообразных областях биологии и медицины. а) Изучение физ. свойств протоплазмы и отдельных частей клетки. Возможность исследовать живую клетку посредством микроинструментов особенно сильно способствовала развитию современ.

Рисунок 10. Приспособление для ультрамикроскопической микрургии (по Петерфи).

знаний об основных свойствах живой протоплазмы и отдельных частей клетки. Полученные таким путем данные легли в основу современной цитологии и протоплазмоведения (Protoplasmaforschung), получившего в последнее время особенно важное значение, поскольку исследование природы живой протоплазмы образует основу всех знаний о динамике жизненных явлений (Зейфриц). Уже простое прикосновение, укол, оттягивание протоплазмы клетки микроиглой позволяют определить агрегатное состояние, консистенцию, вязкость протоплазмы и пр. На рис. 4а (отд. табл., ст. 319—320) видно, как за кончиком иглы тянется нить (тяж) протоплазмы, которая после разрыва оттянутой нити собирается подобно жидкости в капельки (рис. 4Ь). Микрургическая техника дала возможность выработать новый способ определения вязкости (см.) протоплазмы: Гейльброн (Heilbronn), затем Фрейндлих и Зейфриц (Freundlich, Seifriz) и др. вводили внутрь клетки, в протоплазму яиц иглокожих, в плазмодий миксомице-тов и т. п. при помощи микроиглы мельчайшие частички железа или никеля и, притягивая их электромагнитом, заставляли их двигаться: сравнение силы тока, нужного для определенного передвижения (измеряемого при помощи окулярного микрометра) частичек в протоплазме и напр. в воде, дает возможность судить о вязкости протоплазмы. Изучая, как металлические частички, введенные в протоплазму и передвинутые при помощи электромагнита, опять возвращаются к своему первоначальному положению, если выключен ток, удалось получить данные об эластичности протоплазмы. Подобная же техника разработана Фрейндлихом и Зейфрицем для измерения эластичности коллоидных растворов. Особенно демонстративно обнаруживается эластичность протоплаз- мы след. путем: кончики 2 микроигол погружают в амебу, эритроцит, выделенное ядро эритроцита амфибий и т. п. [см. отд. таблицу (стр. 319^— 320), рисунок 5] и затем иглами растягивают объект, если иглы отпустить, объект сокращается (рис. 11) почти до -=о§> Рисунок 12. Рисунок 11. Рисунок 11. Исследование эластичности ядра эритроцита амфибий: а—до растягивания; Ь— растягивание; с—после растягивания. Рисунок 12. Извлечение из делящейся клетки веретена (ахроматинового аппарата) с хромосомами. прежней величины (Зейфриц). В живой клетке протоплазма отличается значительной эластичностью; со смертью эластичность почти совсем исчезает (Зейфриц). Установлено значит, различие физич. и физиол. свойств между внутренней, более жидкой частью клетки и поверхностным, более плотным слоем цитоплазмы, образующим у некоторых клеток не только обычную поверхностную протоплазматическую пленку (мембрану— см. Цитология), но и морфологическую оболочку—пелликулу, к-рую можно отделить микроиглой. Поверхностный протоплазма-тический слой (протоплазматическая оболочка, мембрана), поврежденный или удаленный в каком-нибудь месте микроиглой, быстро восстанавливается и отграничивает обнажен. протоплазму от окружающей среды или же поврежденную часть от здоровой протоплазмы (рисунок 9). Физиологически важно то обстоятельство, что эта мембрана способна изменять свою консистенцию, как и эндоплазма (Чемберс, Зейфриц и др.). Исследованиям при помощи микрургиче-ской техники были подвергнуты различные внутриклеточные структуры: ядро клетки, его содержимое и мембрана, хромосомы делящейся клетки, ядерное веретено (ахро-матиновый аппарат—см. Кариокинез), митохондрии, реснички, жгутики, ундулирую-щие мембраны и т. д. Хотя изучение физ. состояния ядра живой клетки сопряжено с большими трудностями в силу чрезвычайной легкости, с к-рой вещество ядра превращается в относительно плотную желеобразную массу, при очень осторожном введении микроинструментов в ядро (чтобы не наступила коагуляция) все же удается убедиться, что ядро всех исследованных клеток (в интеркинезе) у Metazoa обнаруживает жидкое содержимое, в к-ром ядрышко можно легко передвинуть (Чемберс и его сотрудники). При самом незначительном повреждении ядра (даже при- наблюдении в Рингёровской жидкости, лимфе, сыворотке и т. п.) в нем легко появляется вследствие коагуляции сетчатая или зернистая структура, сходная с картиной фиксированного ядра (Чемберс). Укол ядра сперматоцита, подготовляющегося к делению, индуцирует, ускоряет образование хромосом. При мито-тическом делении удается изолировать хромосомы (см. т. XIII, ст. 69, рисунок 27) и

обследовать их физ. свойства. Веретено (ах-роматиновый аппарат) оказывается гомогенным (не волокнистым), более плотным образованием, чем окружающая жидкая протоплазма; его можно передвигать внутри клетки или вместе с хромосомами извлечь из клетки (рис. 12 и 13). Этот факт лег в основу современных представлений о механизме митоза (Belaf, Вассермаш. О других интересных данных см. специальные монографии и руководства.

б) Исследование реакций клеток на различные воздействия. При помощи микрургич. методики получены ценные данные по физиологии протоплазмы и клеток. Петерфи со своими сотрудниками, исследуя реакцию различных нормальных клеток и клеток карцином и сарком на механическое раздражение и повреждение (укол иглой), установил ряд закономерностей: в разных клетках, как и у амеб в опытах Чем-берса, на месте укола наблюдалось б. или м. выраженное разжижение цитоплазмы (явление «тиксотропии»—наблюдаемое у коллоидов превращение геля в золь и обратно); эта реакция на механическое раздражение выражена у клеток разных типов не одинаково (соответственно вероятно разной коллоидно-химической структуре их протоплазмы): так напр. у миобластов (из эмбрионального сердца), малых моноцитов крови, у раковых клеток (в противоположность саркома-тозн. клеткам) вслед за уколом наступает быстрое и значительное разжижение протоплазмы, у других клеток это явление менее выражено; для больших моноцитов и макрофагов особенно характерно значительное увеличение клетки после воздействия иглой (Петерфи); у нейробластов в тканевых культурах при механическом раздражении изменяется прижизненная окрашиваемость. После укола ядра (рисунок 14) цитоплазма, которая окружает ядро, быстро подвергается дезинтеграции и разжижается (Чемберс, Петерфи) м. б. по причине вредного действия на цитоплазму выходящей из ядра нуклеиновой к-ты (Петерфи). С помощью микропипетки возможно извлечь жидкое содержимое ядра и цитоплазму другой клетки; последняя при этом быстро разрушается (Чемберс). Интересные данные получил Леви в опытах с механическим повреждением микроиглой нервных волокон (рисунок 15 и 16), вырастающих в тканевых культурах: на месте механического раздражения появляются протоплазматические -расширения; если волокно рассечено, периферическая часть волокна, отделенная от нервной клетки, Рисунок 13. Разрушение микроиглой ах-роматиновой фигуры и ее восстановление.

Рисунок 14. Укол ядра. инъицировать его в

Повреж-

обыкновенно гибнет; если же часть волокна, прилегающая к клетке, после разреза соединится с периферическим отрезком раньше, чем он окончательно погибнет (рисунок 16), нервное волокно восстанавливается и продолжает расти. Микрург. методика открыла новую возможность, весьма важную в физиол. отношении: возможность сравнительного изучения действия различных веществ, введенных непосредственно внутрь клетки, с действием тех же веществ извне. В отношении электролитов удалось пролить свет на ¹ дение микроиглои _Ртяпы» р_ППпттый _Rnrmnr ; нервного волокна в старый спорный вопрос, тканевой культуре развивают ли они свое (по Леви).         действие только с по- верхности клетки или же изнутри: К и Na, как оказалось, действуют одинаково и изнутри и снаружи (разжижение протоплазмы, набухание и т. д.); при действии Са и Mg снаружи, внутри клетки не наблюдается резких изменений, при инъекции внутрь клетки наступают тяжелые повреждения протоплазмы, коагуляция и т. п. Водные растворы разных веществ, не проникающие в клетку снаружи, свободно диффундируют по внутренней части цитоплазмы при непосредственном введении их внутрь (Чемберс). в) Определение рН и гН внутри клетки. Развитие микрургической методики позволило ориентироваться относительно истинной реакции внутри клетки,определить водородное число рН (см. Водородные ионы) при помощи колориметрических (см. Индикаторный метод) и электрометрических методов. Чемберс и Поллак (Pollack) посредством микропипетки впрыскивали в протоплазму или ядро клетки (яиц иглокожих) водные растворы индикаторов и непосредственно сравнивали полученную окраску с цветом стеклянных капилярных трубок, наполненных индикаторами, или же с изображениями цветных стандартных пробирок, отброшенными по методу Пентина (Pantin) в поле зрения микроскопа. Таким путем установлено, что рН нормальной цитоплазмы = 6,7 ± 0,1 (по Рисунок 16. Регенера-Needham'v,pH=6,6),TO- "^ия перерезанного гдакак рН морской во- "^ТлевТ""* ды=8,2—8,4. Ядро оказалось щелочнее цитоплазмы: рН=7,5±0,1. Если клетку, в которую впрыснут индикатор, повредить микроиглой [см. отд. табл. (ст. 319—320), рисуяок 6], то поврежденный участок приобретает более кислую реакцию—до рН=5,6 и ниже. Шмидтман, внося иглой микроманипулятора внутрь клеток разных тканей и органов мельчайшие зернышки индикаторов, определила рН клеток разных органов: рН эпителия извитых почечных канальцев—6,7—7,2; печени—6,7—

7,5; поджелудочной железы—7,2—7,5; эндотелия капиляров—6,3—6,4 и т. д. При мутном набухании клеток протоплазма приобретает более кислую реакцию. При кормлении к-тами или щелочами удалось заметить изменение рН в органах, участвующих в восприятии и выделении введенных веществ (Шмидтман). Были произведены и потен-

о о о о о о

Рисунок 17. Схема изолирования отдельной бак-. терии: а—покровное стекло с несколькими капельками, содержащими бактерии; Ь—отдельная капелька и кончик микропетли; с—е— (при большем унеличении) вытягивание микропетлей маленькой капельки с одной бактерией (из Кюстера).

циометрические измерения при помощи неполяр изующихся микроэлектродов, введенных внутрь клетки; рН сока клетки Nitella было найдено равным около 6,16; относительно протоплазмы данные еще недостаточно наделены. При помощи микрургической техники оказалось возможным также исследовать одну из важнейших проблем внутриклеточной активности—определить окислительно-восстановительный потенциал протоплазмы, характеризующийся величиной гН. Путем микроинъекции внутрь клетки системы индикаторов Дж. и Д. Нидгемы определили внутри амебы (Amoeba proteus) pH=7,6, гН = 17—19 (т. е. в клетке слегка щелочная реакция и небольшой сдвиг в восстановительную сторону от пункта окислительно-восстановительной нейтральности); внутри яиц морских ежей и звезд, туникат рН = 6,6 (при цитолизе понижалось до 5,0 и 4,0), а гН варьирует между 19 и 22 (т. е. восстановительная способность меньше, чем у амебы). В клетках слюнных желез личинок насекомых Рапкин и Вурмсер (Rapkine, Wurmser) нашли рН=7,2, гН = 19,0—20,4; в клетках спирогиры гН = 14—16; гНпри разных условиях может значительно варьировать. г) Изолирование одной бактерии. Современная микрургическая методика является также наиболее надежным путем для выделения и изолирования одной единственной бактериальной особи из массы бактерий. При помощи ее возможно не только изолировать какую-нибудь одну бактерию, что удавалось уже основателям мик-рургии Шоутену (1903) и Барберу (1904), на и выбрать определенную бактерию и именно ее изолировать для получения из нее колонии, для прививки ее животному и т. п. Такая работа производится в наст, время с полной уверенностью, при надежном контролировании всех манипуляций под микроскопом, даже если приходится иметь дело с очень мелкими микробами, напр. с одним определенным, заранее намеченным пневмококком: в подобных случаях особенно ценной оказывается микрургическая техника работы при темнопольыом освещении.— Изолирование бактерии можно производить при помощи микроиглы, микропипетки или микропетли. На рис. 17 показаны фазы изо- лирования бактерии из небольшой капельки содержащего бактерии материала при помощи стеклянной микроиглы, загнутой в виде бактериол. петли; на фотографии [см. отд. табл. (ст. 319—320), рис. 7] снята петля с пленкой захваченной жидкости; в центре—одна единственная бактерия. Петерфи для изолирования бактерий применяет микропипетки (приготовленные из тонкостенного капиляра диаметром в 1 мм) с отверстием в 3—5 [I. На покровное стекло на-шосится капелька содержащего бактерии материала (из культуры, из крови зараженного животного и т. д.), рядом капелька •физиол. раствора или питательной среды. Из самого края первой капли, где бактерии лежат в один слой, в пипетку втягивается одна бактерия и переносится во вторую каплю. Для прививки животному микропипетку с изолированной бактерией можно вынуть из микроманипулятора и ввести конец ее под кожу (или в брюшину) через заранее подготовленный разрез. Таким путем удалось заразить животных действительно одной единственной бактерией. При помощи микропипетки можно также заразить тканевые культуры Trichomonas, им-плянтировать одну изолированную клетку саркомы в культуру фибробластов, моноцитов и т. д. Лит.: Кронтовский А., О микрооперациях над клетками в тканевых культурах, Врачебное дело, 1927, № 13; ChambersR., The physical structure of protoplasm as determined by micro-dissection and -injection (General cytology, ed. by B. Cowdry, p. 237, Chicago, 1925); о н ж е, Technic of micromani-pulation (Handbook of microscopical technic, ed. by •C. Mc Clung, N. Y., 1928); он же, The nature of the living cell as revealed by micromanipulation (Colloid chemistry, ed. by J. Alexander, v. II, N. Y., 1928); P 6 t e r f i Т., Mikrurgische Methodik (Hndb. ■й. biol. Arbeitsmethoden, hrsg. v. E. Abderhalden, Abt. 5, T. 2, H. 5, Lief. 124, В.—Wien, 1924); о н ж е, Die Technik der Zelloperationen—Mikrurgie (Methodik der wissenschaftlichen Biologie, hrsg. v. Т. Рё-terfi, B. I, p. 559, В., 1928); Photographisches Prak-tikum fur Mediziner u. Naturwissenschaftler, hrsg. v. A. Hay, p. 189 u. 336, Wien, 1930. ГЛИКСЕДЕМА (от греч. myxa — слизь и ■oedema—отек), слизистый отек или б-нь Гелл г (Gull). Название М. дано в 1877 году Ордом (Ord) на основании особенностей кожи при этом заболевании; первые клин, наблюдения относятся к 1874 г. и принадлежат Геллу. В 1879 году Шарко (Charcot) ■описал эту б-нь под названием «cachexie pa-chydermique». В дальнейшем М. стали ди-агнолщровать так часто, что уже в 1883 г. в Англии была создана специальная комис--сия по ее изучению. Кохер (Kocher, 1882) и Реверден (Reverdin, 1883) почти одновременно установили идентичность М. с сим-птомокомплекеом, возникающим через несколько месяцев после операции полного •удаления щитовидной железы при зобе (так наз. cachexia strumipriva). Это учение через несколько лет нашло полное подтверждение в работах Шиффа, Эйзельсберга, Горслея, Бирхера (Schiif, Eiselsberg, Horsley, Bir-«cher), сделавших первую имплянтацию щитовидной железы тиреопривным б-ным, затем в работах Глея (Gley) и Меррея (Murray; 18^1), применивших подкожное введение глицеринового экстракта из щитовидной железы, и наконец в работах Фермерена и Говица (Vermehren, Howitz), предложив- ших применять препараты щитовидной железы per os. Впоследствии, когда научились избегать паратиреопривной тетании при ти-реопдеятомии у животных, удалось и у них^ удаляя щитовидную железу, вызывать сим-птомокомплекс, близкий к М.; удавалось это, правда, не у всех и не всегда; в частности у нек-рых собак на аорте имеются добавочные щитовидные железы, препятствующие экспериментальной М.—М. проявляет-себя по-разному в зависимости от того, появляется ли она в зрелом возрасте или в периоде роста. Различают поэтому 2 основных типа: М. у взрослых и М. у детей; последняя в свою очередь делится на врожденную и детскую. М. взрослых в основе заболевания имеет* недостаточность щитовидной железы, характеризующуюся трофическими расстройствами, в особенности эктодермальных образований, и вялостью вегетативных и психич. функций. Особенно распространена М. в Шотландии и Северной Америке и лишь изредка встречается в странах, где население поражено зобом. В выраженной форме болезнь эта встречается сравнительно редко, значительно чаще в стертой форме, причем преимущественно у женщин (отношение мужчин к женщинам в среднем 1:8); страдают гл. образом замужние женщины, особенно многорожавшие. Наиболее благоприятствующий развитию М. возраст—35—45 лет; весьма часто заболевание начинается в периоде климакса. В более молодом возрасте преобладают выраженные стертые формы. Этиология и патогенез. Если генотипическая природа Базедова б-ни не вызывает в наст, время сомнений, то относительно М. взрослых вопрос этот далеко еще не выяснен. Указаний на случаи внутрисемейного заболевания М. имеется много, но нет настоящих родословных, способных внести ясность в решение вопроса о генотипической природе М. Еще Орд отметил, что в 8% всех случаев М. имеются семейные заболевания. Баррет (Barrett) у 62 членов одной семьи отметил явления гипотиреоза. Имеются указания, что в семьях микседематиков встречаются разные эндо-кринопатии и (что особенно интересно)—ги-пертиреозы (Серейский, Фрумкин и Ка-плинский). Серейский наблюдал также больную, у к-рой имел место самопроизвольный переход от классической формы Базедова б-ни к микседеме. Куршман (Curschmann) подчеркивает, что у микседематиков уже до б-ни можно обнаружить т. н. неустойчивость щитовидной железы, т. е. сочетание гипо-и гипертиреозных признаков. То обстоятельство, что М. взрослых часто появляется в позднем возрасте, чаще у женщин, притом. много рожавших, заставляет предположить, что истощение полового аппарата играет роль если не прямо этиологическую, то способствующую проявлению этой б ни. Из других факторов, способствующих возникновению М. взрослых, приводят псих, и физ. травмы, сифилис, tbc, актиыомикоз щитовидной железы, острые и хрон. тиреоидиты— в связи с инфекционными заболеваниями (тиф, суставной ревматизм, сепсис и пр.). Наконец часть случаев вызвана оперативным вмешательством или чрезмерно энергичным лечением базедовиков рентгенизацией. Известную роль может играть ухудшение питания (недостаток триптофана—ингредиента тироксина), чем объясняется увеличение заболеваемости мужчин во время войны. Влияние питания на щитовидную железу выявлено опытами Адлера над ежами и летучими мышами, находившимися в состоянии зимней спячки и в условиях голодания, у которых обнаружены регрессивные явления щитовидной железы. Впрыскиванием тиреоидина удается этих животных разбудить от сна. Пат. анатомия М. в виду разнообразия этиологии не является во всех случаях одинаковой. В нек-рых случаях кроме харак ерного изменения кожных покровов никаких особых нарушений ни в одном органе, не исключая и щитовидной железы, не обнаруживают. Однако в большинстве случаев находят изменение щитовидной железы типа склеротической атрофии, к-рое хорошо объясняет лежащее в основе б-ни понижение фнкц. способности этого органа. Указанная склеротическая атрофия обычно является следствием того или иного воспалительного процесса в щитовидной железе, причем характер изменений и степень их бывают разными. Иногда дело ограничивается уменьшением веса и объема железы при небольшой убыли паренхимы и слабо выраженном разрастании межуточной соединительной ткани; в других случаях железа кроме уменьшения в объеме оказывается плотной, бледной и под микроскопом состоящей только из одной соединительной ткани с островками жировой клетчатки (Абрикосов). Между этими крайностями наблюдаются всевозможные переходы. При сохранении среди разросшейся соединительной ткани фоликулов последние имеют неправильную форму и атрофический эпителий; иногда имеется десквамация эпителия. В соединительной ткани могут наблюдаться те или иные остатки воспалительного процесса в виде очаговых инфильтратов. В редких случаях М. в щитовидной железе находили актиномикоз, туб. процесс, сифилитические изменения, развитие множественных аденом. Из изменений других эндокринных желез отмечено увеличение передней доли гипофиза с увеличением в нем количества хромофильных (базофиль-ных) клеток и скоплением коллоида в железистых ячейках (Абрикосов), уменьшение зобной железы и инфантильное состояние половых желез.—Изменение кожи состоит в том, что слой ее является утолщенным за счет своеобразного отека, распространенного гл. обр. в соединительной ткани собственно кожи и в подкожной клетчатке; соединительнотканные пучки оказываются раздвинутыми скоплением слизеподобного вещества, принимающего базофильный оттенок при окраске гематоксилином, однако не окрашивающегося муцикармином и не дающего метахромазии при окраске тиони-ном. На основании этих свойств большинство исследователей отвергает присутствие при М. в коже настоящего муцина и предпо- читает говорить о накоплении не слизистого, а слизеподобного вещества. Эпидермис обычно не изменен; в сосочковом слое соединительной ткани заметно небольшое размножение клеток. Симптоматология. Б-нь развивается медленно; остро развивающиеся формы должны вызывать диагностические сомнения. Из симптомов надо на первый план поставить изменения кожи и подкожной клетчатки, определившие название-бгле^ни. Кожа становится отечной, одутловатой, толстой, плотной, причем эти изменения избирательны; они касаются определенных участков тела, прежде всего лица (веки, щеки, нос, губы), шеи, конечностей (предплечье, кисти, голени). Благодаря отечности век, гл. обр. верхних, глазная щель становится очень узкой. Отек лица. сглаживающий складки, делает лицо бедным мимикой, выражение лица тупым; оно напоминает полнолуние. В отличие от лица, при отеках сердечных и почечных больных здесь имеются грубые складки на лбу, еще' более подчеркивающие тупой вид микседе-матиков. Небольшие складки имеются на всей коже; складок иного происхождения на коже при отеках нет; она равномерно напряжена. Отек распространяется на шею, отчего голова как бы входит в плечи, становится мало поворотливой; в надключичной области образуются толстые, зернистые-наощупь валики, т. н. псевдолипомы. Кисти рук и ног принимают характерный лопатообразный вид. Отеки, в начале преходящие, впоследствии становятся стойкими; в отличие от отеков у сердечных и почечных б-ных при М. труднее получить надавливанием ямку; отеки плотнее, по крайней мере в более позднем стадии заболевания. Плотность пытаются объяснить тем, что в подкожной клетчатке скопляется не вода, а муцин. Отечность б. ч. переходит и на слизистые, вызывая чувство сухости во рту. Отечный язык плохо умещается во рту, что впрочем зависит не только от отека, но и от разрастания соединительной ткани языка; гипертрофированы и сосочки языка. При отечности гортани б-ные говорят сиплым голосом; отечность язычка, миндалин затрудняет дыхание через нос. Переход. отечности на Евстахиеву трубу и слуховой проход ведет к понижению слуха. Кожа отличается крайней сухостью, зависящей от резкого понижения потоотделения, наощупь холодна, шероховата, сильно Шелушится, как бы обсыпана мелом. В отличие от теплых и влажных конечностей при ангионе-врозах здесь конечности холодные, но толстые и сухие. Цвет кожи бледный, алебастровый, нередко с желтоватым оттенком, особенно на лице (т. н. face jaune); на щеках, кончике носа и губах имеются и циа-нотичные участки (благодаря расширению вен); реже кожа имеет желтоватую или ко-рпчневлю пигментацию. Сухая кожа является у многих микседематиков благоприятной почвой для экзем. Волосы на голове (брови, ресницы,, борода) и на туловище становятся тоньше-или совсем выпадают. Характерно выпадение волос над ушами и на затылке. Левц 33» и Ротшильд (Levi, Rothschild) считают характерным выпадение наружной трети бровей (т. наз. симптом бровей). Волосы отличаются сухостью, ломкостью, теряют блеск. Ногти тоже становятся ломкими, хрупкими, дают трещины. Зубы (часто кариозные) выпадают. — Щитовидная железа б. ч. атрофична,. плохо или совсем не прощупывается; обычно пальпируется прямо щитовидный хрящ; иногда отдельные части уменьшенной по размерам железы тверды наощупь; остальная часть не прощупывается. В редких случаях имеется струмозное увеличение щитовидной железы. Сама пальпация при короткой шее и одутловатости ее нередко затруднительна, тем более что она не всегда дает правильное представление о состоянии щитовидной железы даже у здорового человека. К тому же пальпация не дает представления о гист. изменениях железы, к-рые могут и не отразиться на ее форме и консистенции.—По-ловые железы. Из других эндокринных желез чаще всего поражены половые, в особенности у женщин. Менструации становятся скудными и часто совсем прекращаются; реже бывают мено- или метрора-гии. У женщин нередко наблюдается атрофия половых органов, исчезают вторичные половые признаки и появляются признаки гетеросексуальные; многие из б-ных становятся стерильными в половом отношении. В случае наступления беременности основная б-нь либо ухудшается либо же благодаря усилению функций щитовидной железы отмечается, наоборот, благотворное влияние беременности. Климакс, кастрация, вызванная оперативно или рентгеном, служат нередко толчком для развития М. как у мужчин, так и у женщин. У мужчин грубые изменения полового аппарата встречаются редко; дело ограничивается б. ч. фригидностью, половым бессилием. В отдельных случаях встречается комбинация микседе-мы с недостаточностью эпителиальных телец, с тетанией. Кровообращение при М. резко нарушено. Цондек (Zondek) считает большинство микседематиков сердечными б-ными. Прежде всего отмечается расширение правого и левого сердца, достигающее иногда огромных размеров; на рентгене такое сердце отличается вялыми, едва заметными сокращениями, контуры сердца выступают четко. Под влиянием тиреоидина такое сердце «тает», принимая в несколько недель почти нормальные размеры. Цондек объясняет расширение сердца 2 факторами: 1) понижением тонуса симпат. отдела вегетативной нервной системы, вследствие чего гипотонические мышцы желудочков сердца легче поддаются напору крови, и 2) отечностью волокон миокарда. Менее характерны для миксе-демы по крайней мере для ранних стадиев заболевания данные электрокардиографии, а именно полное или частичное отсутствие зубцов РиТ электрокардиограммы, картина, противоположная тому, что мы видим при болезни Базедова. В последнее время имеются сомнения, в какой мере указанные изменения электрокардиограммы специфичны и не зависят ли они от повышенной со- противляемости кожи при микседеме. На основании плетисмографических данных Цондек заключает еще о вялости сосудо-двигательного центра. Одновременно имеются слабое потоотделение, зябкость, низкая температура тела (на ¹₂—1 гррдус ниже нормы), вялые вазомоторные реакции, слабый дермографизм, бледность, акроцианоз и пр. Тоны сердца глухие; очень характерна стойкая брадикардия. Кровяное давление б. я. нормальное или понижено. В общем сердечно-сосудистые расстройства при М. менее серьезны, чем при Базедова б-ни-Субъективные жалобы при М. очень незначительны. Имеется много указаний на то,. что М. вызывает ранний артериосклероз (Kraus и др.), раннее постарение; Лоран (Lorand) и др. связывают процесс старости с атрофией щитовидной железы. Эта односторонняя точка зрения привела к таившему в себе опасность лечению стариков тиреоидином. Кровь обнаруживает б. я. вторичную анемию, обеднение гемоглобином (до 40— 50%), эритроцитами (до 2—3 млн.), цветной показатель ниже единицы. Общее количество лейкоцитов б. ч. понижено (до 4 000— 5 000); вместе с тем имеются лимфоцитоз и незначительная эозинофилия (по Бауеру. эта картина конституции дегенеративной крови не связана специфически с гипофункцией щитовидной железы). Из физ.-хим. свойств надо отметить повышение свертываемости крови (Kottmann; Бауер оспаривает), повышение вязкости (до 2—3%) и концентрации белков (до 10,41%). Последнему соответствует отложение белков в тканях; Седерберг (Soderbergh) подчеркивает ускорение оседания эритроцитов при М. Котман находит свою фотореакцию при М. усиленной (оспаривается). Наконец сывороточно-атропин. реакция Штернберга дает при ми-кюдеме такие результаты: сыворотка этих больных даже со слабым раствором атропина (например 1:3 000 — 4 000) вызывает довольно быстрое расширение зрачка кошки. По Фейлю и Штурму (Veil, Sturm), при М. имеется резкая гипоиодемия. Кроме того имеется пониженное содержание неорганического фосфора в крови.—М о я а. Суточное количество мочи б. ч. уменьшено, особенно на высоте б-ни.—О р г а н ы дыхания без изменений, дыхание лишь несколько замедленно, поверхностно, но правильно.—Ж е л.-к и ш. тракт. На первом месте запоры, которые хорошо поддаются действию тиреоидина; рентген обнаруживает резкую атонию, особенно толстых кишок, что объясняется пониженным тонусом блуждающего нерва. Влияние М. на секрецию и кислотность желудочного сока непостоянно, хотя превалируют случаи понижения кислотности; нередко отмечается метеоризм. А петит понижен; тем резче бросается в глаза склонность к прибавлению в весе.— Органы движения. Костная система, суставы редко подвергаются изменениям; остеотропное действие щитовидной железы относится лишь к периоду роста (см. ниже). Встречаются комбинации М. с сенильной остеомаляцией, остеопорозом, с хрон. полиартритом; Леви и Ротшильд пря- мо говорят о «тиреогенном ревматизме»; едва ли однако есть основание считать гипофункцию щитовидной железы патогенетическим фактором: она лишь способствует проявлению артрита. Обмен веществ. При той роли, какую играет щитовидная железа в процессах обмена, естественны наблюдающиеся при М. резкие его отклонения. Газообмен, в частности основной обмен, обычно понижен на 40%—50%, в легких случаях—на 20—30%; этот симптом является самым характерным для М., и чрезвычайно показательно, что достаточно маленьких доз тиреоидина (несколько дней по 0,3 г тиреоидина или по 0,5 мг тироксина), чтобы повысить основной обмен. В полном соответствии с торпидностью протекающих при М. процессов, в частности процессов обмена веществ и в вегетативной нервной системе, специфически динамическое действие белков пищи либо понижено либо отсутствует (С'ерейский и Жислина). В части случаев основной обмен не понижен; эти случаи пытаются объяснить диссоциированным действием тироксина, к-рый, по Кепделу (Kendall), имеет д^е фракции: А, действующую на'водяной обмен, и В, действующую на прочие виды обмена. Там, где преобладает расстройство фракции А, имеются отеки, но нет понижения газообмена.—Б е л к о-вый обмен тоже понижен, с мочой выделяется в течение суток 5—9 г азота. В связи с понижением сгорания белков естественно, что даже при пониженном питании возможно отложение белка не только в клетках, но и в отечной жидкости. Содержание мочевэй к-ты в моче либо нормально (Цондек) либо понижено (Magnus-Levy), в крови же резко понижено (1—1,4 мг%), причем под влиянием тиреоидина количество мочевой к-ты повышается.—В о д я-ной и солевой обмен. При М. происходит часто (но не всегда) замедление процессов хлоро- и водообмена. По Эппин-геру (Eppinger), выделение воды а также солей резко усиливается под влиянием тиреоидина, к-рый действует диуретически не прямо на почки, а путем мобилизации воды и солей из тканевых депо. Фальта и Гег-лер (Falta, Hogler) нашли, что прибавление NaCl к пище вызывает увеличение отеков и прибавление веса б-ных; при пище, свободной от NaCl, происходит обеднение организма водой, при добавлении же еще и тиреоидина отеки совзем исчезали. Количество хлоридов в моче и крови близко к норме.—У глеводный обмен. У большинства микседематиков имеется лучшее, чем в норме, использование углеводов, повышенная толерантность к ним (даже нагрузка сахара и введение адреналина не вызывают гликозурии), к-рую объясняют выпадением тормозящего действия щитовидной железы на поджелудочную железу(Фаль-та). Впрочем в части случаев наблюдается и пониженная толерантность к углеводам; возможно, что это те случаи, где поражены и паращитовидные тельца, сами по себе понижающие углеводную толерантность. Понижением обмена веществ объясняется до известной степени склонность некоторых ми- кседематиков к ожирению (т. н. т и р е о-генное ожирение). Это имеет мест» в начале б-ни и при т. н. неполных формах. С нарастанием б-ни апетит настолько ухудшается, что б-ные начинают худеть; тогда осторожная дача тиреоидина действует парадоксально, повышая вес больного. Нервная'система. При исследовании нервной системы необходимо делать выводы с большой осторожностью, тгк как данные исследования могут быть искажены своеобразным псих, состоянием (вялостью и пр.), а также толщиной кожи; последнее особенно важно учитывать при исследовании чувствительности, рефлексов, электрической возбудимости. Неудивительно поэтому, что данные различных авторов противоречат друг другу; так, одни считают. что электрич. мышечная возбудимость при М. повышена, другие находят ее пониженной, третьи нормальной (последнее как-буд-то чаще всего).—Из органов чувств чаще всего бывают поражены слух (в половине случаев по Вагнер-Яурегу) и зрение, реже—обоняние и вкус. Б-ные нередко жалуются на парестезии, головные боли (особенно в области затылка), головокружения, ревматоидные боли в суставах, спине, крестце. Сухожильные рефлексы понижены; иногда сокращения мышц протекают червеобразно, особенно на брюшных мышцах. Кожные рефлексы б. ч. нормальны. Мелкий тремор языка, рук. Мышцы гипотоничны, слабы; походка в связи с общей медлительностью вялая, тяжеловесная, расхлябанная. Парезы, параличи бывают редко. Куршман считает некоторые расстройства движения при М. амиостатическими и сравнивает их с паркинсонизмом. Ряд авторов наблюдали мозжечковые явления при М.: мозжечковую атаксию, адиадохокинез, асимметрию и дисметрию, которые под влиянием тиреоидина исчезали. Описаны комбинации М. с тетанией. Отмечается понижение возбудимости обоих отделов вегетативной нервной системы, чем и объясняется пониженная вазомоторная возбудимость, ани-дроз, брадикардия, гипотермия и пр. Инъекции адреналина, пилокарпина и атропина не дают никакой реакции. Исключением из этого правила служит наблюдаемая у нек-рых микседематиков повышенная чувствительность к тиреоидину (сердце и потоотделение), что может объясняться диссоциированным действием тироксина. В связи с пониженным обменом веществ и пониженной нервной возбудимостью инфекционные б-ни при М. протекают при более низкой t°. Так напр. в случае Бухштаба брюшной тиф протекал при 37—38°; так же протекали в случае Шерешевского «испанка» и воспаление легких. Психика. С псих, стороны М. характеризуется нарастающим замедлением всех псих, и психомоторных функций; это касается центростремительных, интрапсихи-ческих и центробежных функций. Восприятие внешних впечатлений затруднено, больные становятся тяжелодумами, мысли их как бы завуалированы. Интелект в строгом смысле слова сохранен, качественная сторона апперцепции, способность к су- Ml ждению сохранены, но при этом отмечается ослабление памяти, особенно на последние события. Одновременно нарастают и психомоторная заторможенность, отсутствие решимости; выполнение простейших житейских задач требует огромных усилий. Так, один б-ной требовал для выполнения простейшего акта 3 минут, вместо 30 секунд, причем половина времени уходила на то, чтобы начать выполнение акта. К тому же выносливость бо тьных крайне понижена, малейшее напряжение при выраженной М. вызывает чувство резкой усталости. Сознание ясное, ориентировка правильная. Резче всего страдает аффективная сфера. Вначале б-ные реагируют на свое состояние тяжелым ощущением собственной недостаточности, подавленностью, но вскоре они становятся апатичны, грубы, безучастны, теряют интерес к окружающему, к будничным и прочим занятиям, впадают в сонливость, становятся в высокой мере беспомощными. В общем для М. характерно не депрессивное настроение, как это сплошь и рядом приходится читать, а апатичное, ворчливо-недовольное. Сюда следует прибавить 1) медленную, тяжеловесную походку, которую Бремуел (Bramwell) сравнивает с походкой гиппопотама; 2) вялость движений (б-ные часами не двигаются и до такой степени избегают движения, что вызывают подозрение, нет ли у них парезов, параличей); 3) амимию и 4) монотонную, медленную речь; поэтому вполне понятным становится сравнение микседематозного состояния с зимней спячкой (Шарко). Малая интелектуаль-ная живость, неподвижность ведет естественно к застреванию на одних и тех же мыслях и персеверации, вплоть до образования навязчивых идей. К иллюзиям, галлюцинациям, если таковые эпизодически возникают, б-ные относятся с полной критикой. Если б-нь длительна, то в конце-концов описанное состояние переходит в состояние торпидного слабоумия, в первый же период сходство со «слабоумием» и «меланхолией», как обычно изображают, лишь внешнее. Пожалуй больше сходства имеет это состояние с брадифренией (Naville) или с отсутствием импульсов, что наблюдают при эпидемическом энцефалите. Это сходство еще усиливается рядом признаков: наличием галлюцинаций с критическим к ним отношением, персеверацией, вегетативными симптомами (пониженное отделение пота, сухость кожи, зябкость, отеки, трофические расстройства, ожирение и пр.). Возможно, что и при М. наряду с поражением кожи имеется и поражение подкорковых областей, но доказательств этому пока нет. Настоящие психозы (маниакально-депрессивный, схизофрения и пр.) теперь, когда успешно применяется органотерапия, наблюдаются все реже и реже: это тем понятнее, что настоящие психозы появляются обычно в позднем стадии заболевания М. Между тем раньше такие психозы были далеко не редкостью. Так, по данным англ. комиссии Орда на 109 М. было 50 случаев (около 50%) с психотическими расстройствами, среди них 16 с тяжелыми психозами (главным образом меланхолия). На вопрос, существуют ли специфические микседематозные психозы, надо ответить отрицательно, разве только характерным можно считать то обстоятельство, что в разнообразных картинах психоза просвечивают часто признаки микседематозного-душевного состояния (Pilcz) и замедленность психических процессов даже тогда, когда налицо моторное возбуждение. Описанные при М. психозы можно разбить на несколько форм. Так, наблюдаются апати-чески-дементная форма с бредовыми идеями (гл. обр. идеи ущерба), эпизодическими приступами агресивности; далее состояние галлюцинаторного бреда по типу «экзогенных реакций»—-возбуждение с галлюцинациями, спутанностью. Описанные случаи маниакального возбуждения имеют нетипичный характер: вместо веселого настроения—скачки идей, раздражительность, импульсивность, спутанность, галлюцинации. Иногда наблюдается картина типичной в общем депрессии с тоской, идеями самообвинения, страхами, попытками самоубийства, но (что нетипично) с обилием галлюцинаций. Если психозы как правило появляются в поздних стадиях заболевания М., то в редких случаях психоз даже предшествует соматической картине. На характере психоза может отразиться и т. наз. препсихотическая личность б-ного. В частности истерическая конституция, частый относительно фон для Базедова б-ни, является плохой почвой для микседематозных психозов. В отдельных случаях М. служит толчком для развития эндогенного психоза. При тесной связи между М. и расстройством других эндокринных желез (половые, гипофиз и др.) не всегда легко решить, за счет какой железы отнести данное психическое расстройство. Замедленность псих, функций, аффективная вялость, ворчливо-депрессивное состояние указывают скорее всего на поражение щитовидной железы. Терап. успех в отношении психоза иногда необычайный. Так, в случае Бонгеффера (Bonhoeffer), где наблюдался острый психоз параноидно-галлюцинаторного характера с резким возбуждением, через два дня после дачи тиреоидина состояние стало значительно спокойнее, а через 2 недели б-ной совсем выздоровел. Формы М. Различают классическую М. взрослых и неполные стертые формы; на последние обратил внимание еще в 1899 г. Гертог (Hertoghe). Этот синдром, который он назвал hypothyreoidie benigne chronique, характеризуется рядом гипотиреозных признаков: прибавление в весе, выпадение волос на голове и бровях, сухость кожи, ломкость ногтей, хриплость голоса, запоры, зябкость, утомляемость, сонливость, реже головные боли, мышечные боли, метрорагии. Диагноз этой формы основывается на терап. эффекте тиреоидина. Куршман относит к признакам доброкачественного неполного хронического гипотиреоза т. наз. тиреогенное ожирение, запоры, аменорею, отечность, дерматиты. Прогноз зависит гл. обр. от того, своевременно ли начато органотерапевти-ческое лечение. Течение б-ни хроническое. Без терап. вмешательства б-нь прогресси- рует и ведет (по Кохеру не позже чем через 7 лет, по Morvan'y через 16 лет) к кахексии и смерти. Б-ные часто гибнут от инфекционных б-ней, так как недостаточная функция щитовидной железы понижает резистентность к инфекциям.—Д и а г н о з при выраженной форме не вызывает сомнения. Решающими моментами являются величина основного обмена и эффект от применения тиреоидина. От нефротических отеков ми-кседема отличается плотн. характером отека, отсутствием в моче белка и форменных элементов, понижением основного обмена и псих, вялостью. Некоторое сходство М. имеет с акромегалией, но при акромегалии кожа влажная, имеется гипертрихоз, нет псих. вялости. Сходную картину с М. описал Дальше (Dalche) под названием псевдоми-кседема «овариальная», «сифилитическая». С гипотиреозом сходен т.н. кататонический отек, описанный в 1903 г. Дидом и Трепса (Dide, Trepsat). Лечение при М. является благодарнейшей задачей медицины. Специфической терапией является тиреоидин. Как он действует—ускоряя каталитические хим. процессы в организме или же обезвреживая ядовитые продукты распада—еще неясно. Это терапия заместительная, поэтому доза не должна быть чрезмерно мала; с другой стороны, учитывая высокую чувствительность отдельных лиц к тиреоидину, целесообразно начинать с 0,1 два-три раза в день. Через несколько дней можно перейти к 0,15, а затем и к 0,2. Если после 2—3 декад применения наблюдается определенное улучшение, то переходят обратно к 0,1 три раза в день, а через 15—20 дней—2 раза в день, и на этом следует остановиться, продолжая давать эту дозу в течение нескольких месяцев. Лечение необходимо вести систематично. Контролем служат основной обмен, вес, самочувствие б-ного, отсутствие тиреотокси-ческих явлений (сердцебиение, головные боли, головокружение, поносы, потливость, тремор и пр.). При неполных формах ограничиваются дозой в 0,1 два-три раза в день в течение нескольких декад. В виду того, что б-ные под влиянием терапии худеют, им необходимо давать богатую белками пищу. 8  общем в течение 15—20 дней, давая по 0,3 тиреоидина в день, можно повысить основной обмен на 20—30%; такой же эффект дает в этот же срок тироксин по 0,5 мгв день [см. отд. таблицу (ст. 23—24), рис. 4, 5 и 6]. Не дают терап. эффекта запущенные случаи, а также случаи вторичной М. (при мозговых и др. б-нях). Привычки к тиреоидину в общем не образуется, но все же в отдельных случаях отмечено и описано влечение к тиреоидину (Серейский). Трансплянта-ц и я шитовидной железы б. ч. не дает длительного эффекта, т. к. железа рассасывается. Воронов настаивает на своих успехах при пересадке щитовидной железы от обезьян. М. у детей. М. у детей впервые описана в 1870 г. Фагге (Fagge) под именем спорадического кретинизма. В 1902 г. Пинелес (Pineles) выделил 2 формы: врожденную, при которой не имеется зачатка щитовидной железы (т. наз. тиреоаплазия), и детскую, при к-рой щитовидная желе- за нормально заложена, но в первые годы жизни вследствие различных причин подвергается полной или частич. атрофии. Раннее начало и более тяжелые расстройства говорят в пользу первой формы, но точный диагноз может быть поставлен только на аутопсии. Различить эти две формы тем труднее, что и при врожденной форме пат. явления могут выступить лишь через несколько месяцев после рождения; допускают, что организм ребенка живет за счет тироксина, полученного пляцентарным путем, а может быть и через молоко матери (последнее оспаривается, т. к. в молоке тироксина не находят). М. врожденная сама по себе редкое заболевание, распространенное равномерно, в то время как М. детская, подобно М. взрослых, чаще встречается в Англии и Сев. Америке. Нет М. в зобных местностях. Обе формы чаще встречаются у девочек, чем у мальчиков. Этиология и п атогенез. При М. врожденной имеется полная агенезия, отсутствие зачатка щитовидной железы (такие б-ные обычно очень недолговечны и умирают, еще не достигнув пубертатного периода) либо же налицо дистопия, т. е. смещение щитовидной железы, отсутствие ее на должном месте и нахождение чаще всего в корне языка, причем ткань ее не совсем полноценна. Оперативное удаление этих дистопиче-ских образований вызывало явления острой М. Идентичная картина наблюдается в тех случаях, где щитовидная железа еще ante partum подвергается атрофическому процессу; о природе такого рода внутриутробной вредности ничего определенно не известно. По поводу этиологии детской М. можно в общем сказать то же, что по поводу М. взрослых; атрофия щитовидной железы обнаруживается м. б. в связи с перенесенными инфекционными заболеваниями (чаще всего корь), с травмами. Некоторые авторы оттеняют роль кормилиц, страдающих недостаточностью щитовидной железы, могущих способствовать заболеванию. Спольверини (Spolverini) приводит случаи, когда базедо-вичка родила нескольких детей с явлениями М.; когда же этих детей передали посторонним здоровым кормилицам, то дети выздоровели. Данные наследственности при М. врожденной и детской почти не изучены. Имеются общие указания, что среди предков микседематиков отмечены зобатые. Интересен случай Абельса (Abels): мать, ее отец, ее брат и сестра болели зобом; дочь родилась с тиреоаплазией. М. у братьев и сестер бывает очень редко (в случае Sachs 'а, Власовой и Казанцевой двое в семье страдают М.,в случае Zopffel'a—трое). Куршман подчеркивает, что в пользу гёнотипической природы М. говорит ее частое сочетание с конституциональными заболеваниями: си-рингомиелией, мышечной дистрофией, тетанией. Пат. анатомия. В дополнение к идентичным изменениям при М. взрослых надо прибавить изменения костей (см. ниже) и изменения центральной нервной системы. Макроскопические исследования мозга ничего не обнаружили, микроскопических исследований при М. имеется очень немного (Bourneville, Муратов). Многократно отмечали неспецифическое изменение клеток в двигательной зоне коры (Mott и др.). Мари-неско (Marinesco) обнаружил сужение отдельных слоев коры (в особенности супра-гранулярного пирамидного слоя). В работе Лотмара (Lotmar) подчеркивается наличие архитектонических расстройств в коре головного мозга и мозжечке (бедность клеток II и III слоев лобной и теменной доли, увеличение клеток Гольджи). Симптоматология в большинстве своем та же, что и при М. взрослых (изменения кожи резче), но кроме того имеется ряд симптомов, зависящих от того, что заболевание это относится к периоду роста, а именно: расстройства костной системы, половой сферы и психики. Чем раньше начало заболевания, тем эти симптомы выражены резче. Очень характерны расстройства р о е-т а, которые могут стоять в соответствии с тяжестью заболевания самой щитовидной железы. Рост обычно не превышает 1 м, б-ные растут на 2—-3 см в год, однако полной остановки роста не бывает. В смысле взаимоотношения туловища и конечностей ■больные остаются пропорциональными карликами. Непропорционально развита лишь ■большая голова. Трубчатые кости коротки. Роднички долго остаются незакрытыми. В связи с расстройством роста клиновидной кости у всех имеется западение основания носа, придающее выражению лица больных тупой вид. Чрезвычайно важной для диагностики является рентгенограмма дястных и плюсневых костей и эпифизов. Здесь отмечается запоздалое появление островков окостенения^ норме к 7 г. должно быть 8 таких островков, к 12 г.—9; при М. даже первые островки в carpus и tarsus, к-рые должны появиться в первые месяцы жизни, отсутствуют до 8—-10-летнего возраста. Рентгенограмма эпифизов обнаруживает задержку закрытия эпифизарных швов, позднее окостенение хрящей, почему такие б-ные могут расти еще в 30—40 лет. Гетцки и Вейе (Goetzky и Weihe) обратили в последнее время внимание на темные поперечные тени на концах диафизов длинных костей у ми-кседематиков; это общий признак задержки развития костей. Из менее характерных симптомов, связанных с плохим развитием костной системы, надо отметить: позднее появление зубов, склонность их к кариесу, высокое и узкое нёбо и связанную с характером суставов гиперэкстенсию. В половом аппарате отмечают инфантильность наружных и внутренних половых органов (в редких случаях имеются явления гипергенита-лизма); вторичные половые признаки либо появляются поздно либо совсем отсутствуют. В п с и х. о т н ошении надо отметить более резкую в общем степень отсталости, чем при М. взрослых, где явления слабоумия отмечались редко. Уже в первые месяцы можно отметить резкую психомоторную вялость: все движения очень медленны; б-ные много спят, очень спокойны, не плачут. Вялость касается всех псих, функций. Б-ные не реагируют на окружающее, не играют и пр. В интелектуальном отношении они проявляют большую отсталость, вплоть до слабоумия. В особенности умственная недостаточность проявляется ■ при приобретении сведений, где нужна нек-рая сообразительность, а не механическое усвоение. Важное значение имеет картина крови.—Гемоглобин и число эритроцитов понижены, кроме того отмечают резкую эозинофилию; изменения белой крови не постоянны и не показательны. Если еще подчеркнуть нарастающий вес (к рый меньше, чем соответствует возрасту, но больше, чем соответствует росту), одутловатое, заплывшее лицо, толстый язык, одутловатость конечностей, короткую шею, большую грудную клетку (несоразмерно росту), лордоз, вздутие живота, пупочную грыжу, сухость кожи, зябкость, запоры, то получится цельная картина М. детского возраста. Зоба никогда не бывает; иногда отмечают атрофию вил очковой железы.—Слух б. ч. нормален. У многих рано бывают искривления конечностей и утолщение концов ребер, что дало повод авторам ставить М. в связь с рахитом. Наконец уместно отметить, что очаговых симптомов при М. не бывает. Муратов отметил в одном случае врожденной М. повышенную механическую и электрическую возбудимость и резкое повышение сухожильных рефлексов. Как правило развитие соматических и псих, симптомов идет параллельно, но бывают и диссоциации, напр. незначительные явления со стороны кожи и роста и резкая умственная отсталость.—Т ечение б-ни зависит в значительной мере от того, применена ли органотерапия и в какой период заболевания. В случаях врожденной М., где не было применено лечение, б-ные жили в общем недолго [только в случае Ресле (Rossle) 28 л., а в случае Мареша (Maresch)—11 лет]. Б-ные эти не научаются ходить, говорить. О судьбе леченых б-ных см. ниже. Диагноз в ярко выраженных случаях, если еще подкрепить его исследованием основного обмена, не вызывает затруднений. С рахитом М. может иметь нек-рое сходство (отсталость роста, запоздалое появление зубов, запоздалое закрытие родничков); но при рахите обычно не бывает псих, изменений (хотя Huldschinsky говорит о dementia rachitica, но такие явления редки и относятся лишь кочень тяжелым формам), кожные покровы и половая сфера без изменений. Гипофизарный нанизм отличается норм, умственным развитием, отсутствием отеков и нормальной щитовидной железой. Много общих признаков М. имеет с монголизмом; недаром Вирхов отнес монго-. лизм к группе М. Отличия монголизма: монгольские глаза, отсутствие отеков, нормальное потоотделение, эретичность. При хоыдро-дистрофии нет явлений со стороны кожных покровов, имеется микромелия, интелект нормален. Иногда затруднительно бывает различие от эндемического кретинизма. Если признаки б-ни обнаруживаются после второго года жизни ребенка, то это говорит в пользу микседемы, против кретинизма. Наличие зоба говорит с большой долей вероятия против микседемы. Лечение. Эффективность лечения тиреоидином здесь не так значительна, как при М. взрослых. Это объясняется тем, что при детской М. выпадает функция щитовидной железы в период роста и созревания; в этом периоде все органы чувствительнее к выпадению тироксина, что и ведет легче к непоправимым результатам. Начать нужно в среднем с 0,025—0,05 на прием, с 0,1 в сутки и довести до 0,2. Уместно отметить, что дети лучше взрослых переносят высокие дозы тиреоидина. Вместе с тем с грудными детьми надо быть очень осторожным. Нобель и Розен-блют (Rosenbluth) предлагают дозировку пропорционально росту в сидячем положении; при высоте в 30—35 см—2 таблетки по 5 мг сухого вещества; в 36—-41 см—3 таблетки, прибавляя так на каждые 4—5 см по 1 табл.; начиная с 62 см прибавляют на 4—5 см по 1 табл. в 10 мг. Эти авторы настаивают на длительном и системат. лечении, иначе всегда надо опасаться рецидивов. По другим авторам лечение должно продолжаться всю жизнь без перерывов. В некоторых случаях б-ные превращались потом в совершенно здоровых (физически) взрослых людей, но в псих, отношении у них остаются значительные дефекты. Устранить этот недостаток не удается. Здесь кроме органотерапии необходимо упорное обучение и воспитание. Положительное влияние лечения обнаруживается на росте, половом развитии и пр. Особенно благотворно влияние на развитие моторики; б-ные быстро научаются ходить и пр. В общем терап. успех значительнее там, где М. появилась в более старшем возрасте и где лечение начато своевременно. Лит.: Влас о в а А., Два случая микседемы одной семье, Сб. памяти Федынского, М., 1927; К вопросу о наследственности при Мед.-биологич. ж., 1926, вып. 4—5; Случай слизистого отека у девочки врач, газ., 1912, № 5; о н ж е, К методике лечения детской микседемы препаратами щитовидной железы, Мед.-биол. журнал, 1928, вып. 5; П е д е н к о А., Хроническая недостаточность щитовидной железы у взрослых, Рус. вестн. дерматол., 1927, № 5—6; Розанов В., Случай микседемы и зоба у одной и той же больной, Мед. обозр., 1900, май; Рот В., Микседема и ее лечение, М., 1893; Сер ейский М. и Шислина С, Эндокринные расстройства и специфическое динамическое действие белков, Мед.-биол. ж., 1927, вып. 3; Сере й-екий М., Фрумкин Я. иКаплинский М., К клинике вегетативных расстройств, ibid., 1925, вып. 4; Цондек Г., Болезни эндокринных желез, М.—-Л., 1929 (лит.); Eiselsberg A., Die Krank-nsiten der Schilddriise, Stuttgart, 1901; E p p i n-ger H., Das Myxodem (Hndb. d. Neurologie, hrsg. v. M. Lewandowsky, B. IV, В., 1913); он me, Zur Pathologie u. Therapie des menschHchen Odems, В., 1917; Levi L. et Rothschild H., La petite insuffisance thyroidienne et son traitement, P., 1915; Lot mar F., Histopathologische Befunde in Gehirnen von kongenitalem Myxodem (Thyreoaplasie), Ztschr. i. d. ges. Neurologie u. Psychiatrie, B. CXIX, 1929; M a g n u s-L e v у A., t)ber Myxodem, Ztschr. f.'klin. Medizin, B. LII, 1904; Pineles F., Klini-sche und experimentelle Beitrage zur Physiologie der Schilddriise und der Epithelkorperchen, Mitteil. a. d. Grenzgebieten d. Medizin u. Chirurgie, B. XIV, 1904; Scharfetter H., Das Myxodem (Hndb. d. Gei-steskrankheiten, hrsg. v. O.Bumke, В. Х, В., 1929); Si e g e r t F., Die Athyreose izn Kindesalter (Hndb. d. inneren Sekretion, hrsg. v. M. Hirsch, B. Ill, В., 1927); S с h о 1 z W., Myxodem (Spez.Pathologie u.Therapie innerer Krankheiten, B. I, B.—Wien, 1919, лит.); Souques A. et Foil C, Pathologie de la glande thyroide. Myxoedeme (Nouveau traite de la medecine, sous la dir. de G. Roger, F. Widal, P. Teis-sier, v. VIII, P., 1925); Wagner v. JaureggJ., Myxodem u. Kretinismus, Lpz.—Wien, 1912; W i e-1 a n d E., Die Hypothyreosen im Kindesalter (Hndb. «L inneren Sekretion, hrsg. v. M. Hirsch, B. Ill, В., 1927).                                                 M. Серейекий.

• МИКСОБАКТЕРИИ, или слизистые бактерии, встречаются на навозе животных, питающихся растительной пищей, на гниющем дереве и т. п.; в большинстве случаев образуют окрашенные в желтый или оранжевый цвет колонии. В развитии ...
• МИКСОМИЦЕТЫ (Myxomycetes, сип. My-xothallophyta), группа (тип или класс) низших организмов, занимающих промежуточ^ ное положение между растениями и животными и называемая поэтому также Myceto-zoa (грибы-животные). М. особенно характеризуются строением ...
• МИКСТУРЫ (от лат. misc ere—смешивать) (в рецепте обозначается сокращенно «mixt.»), жидкая лекарственная форма, прописываемая для приема столовыми, дессерт- ными или чайными ложками в количестве обыкновенно 100—200—400 г и состоящая из 2 ...
• МИКУЛИЧ Иоган (Johann-Mikulicz Ra-decki, 1850—1905), один из наиболее талантливых учеников Бильрота, у к-рого прошел ординаторский и ас-'а%^*^*^*-          систентский стаж. С 1882 г.—директор хирургической клиники в немецком ун-те ...
• МИКУЛИЧА БОЛЕЗНЬ (Mikulicz), своеобразное симметрическое опухание слюнных и слезных желез. Впервые на это заболевание обратил внимание Фукс (Fuchs; 1891), а подробно изучено было оно Микуличем. В связи с этим нек-рые исследователи считают ...